CRISPR/Cas 시스템을 이용한 유산균 및 그람양성균 유전자 재조합 방법 > 출품기술

본 발명은 CRISPR/Cas 시스템을 이용한 유산균 및 그람양성균 유전자 재조합 방법에 관한 것으로, Cas 단백질을 이용한 RNP 재조합 시스템의 효율을 증대시켜, 재조합이 어려운 유산균 및 그람양성균의 유전자를 높은 효율로 재조합하는 방법에 관한 것이다. 그람양성균과 유산균은 세포벽 구조에 의해 CRISPR/Cas 시스템을 이용하더라도, 유전자를 재조합하기 어렵다는 문제점이 있다. 하지만, 본 발명에서는 Cas 단백질을 이용한 RNP 재조합 시스템에서, 재조합 효소(recombinases)를 더욱 사용하고, 포스포로사이오에이트 DNA 공여체(phosphorothioated donor DNA)를 사용하여, 재조합이 어려운 유산균 및 그람양성균의 유전자를 높은 효율로 재조합할 수 있다.